蜘蛛女王的出现与三级蜘蛛巢的成长状态直接相关。当三级蜘蛛巢存在足够长时间且未被摧毁时，会自动转变为蜘蛛女王，同时在原地留下一个一级蜘蛛巢。这种转化过程需要玩家在三级蜘蛛巢附近活动才能触发，如果玩家距离过远或长时间不接触，转化将不会发生。蜘蛛女王生成时，系统会检测以她为中心半径60距离单位范围内的蜘蛛巢和女王数量，若总数小于4则保留新生成的一级巢穴，反之则消耗掉该巢穴。
蜘蛛女王具有独特的生物特性，她不像普通蜘蛛那样具有夜行性，在没有战斗时会进入睡眠状态。作为召唤型BOSS，她每20秒会自动生成一只普通蜘蛛，当攻击目标为玩家时，每第三只生成的蜘蛛会变为更具攻击性的蜘蛛战士。女王最多可同时控制16只蜘蛛跟随作战，这些随从会主动攻击玩家，但如果玩家远离足够距离，蜘蛛群会返回女王身边。若长时间未被玩家处理，蜘蛛女王会自行消失并重新变为一级蜘蛛巢。
击败蜘蛛女王需要针对性策略而非单纯依靠装备。首要任务是清理周围的小蜘蛛，因为小蜘蛛死亡不会增加女王的仇恨值。推荐使用冰魔杖或催眠吹箭控制女王行动，冰魔杖需命中3次才能完全冻结，催眠则需要4次吹箭。在控制期间集中输出伤害是较为安全的战术。另一种有效方法是将女王引诱至沼泽触手区域，利用环境生物互殴，但需要3-5条触手才能确保击杀。
蜘蛛女王的掉落物具有重要价值，包括怪物肉、蜘蛛丝、蜘蛛腺体以及稀有掉落的女王帽和蜘蛛卵。这些材料对于制作高级装备和扩建蜘蛛农场都至关重要。女王被击杀后掉落的蜘蛛卵可以重新种植，形成可持续利用的资源循环系统，这也是游戏中蜘蛛类资源再生的关键机制。
